實時熒光定量PCR技術

       該技術的實驗原理是將標記有熒光素的Taqman探針 ，或者在反應體係中加入過量的SYBR染料非特異性與模板DNA混合後 ，在一係列溫度的變化作用下 ，熒光素遊離於反應體係中 ，在特定光激發下發出熒光 ，隨著循環次數的增加 ，被擴增的目的基因片段呈指數規律增長 ，通過實時檢測與之對應的隨擴增而檢測熒光信號強度 ，求得Ct值（即每個反應管內的熒光信號到達設定閾值時所經曆的循環數） ，同時利用數個已知模板濃度的標準品或內參作對照 ，即可得出待測標本目的基因的拷貝數 。熒光定量PCR的優點在於其簡便操作 、特異性以及對樣本中目的基因進行定量 ，在分子生物學基礎研究中廣泛應用 。